牛奶外泌體對(duì)皮膚屏障的影響研究
發(fā)布時(shí)間:
2024-07-12
來源:
作者:柏瑋1,韓春樂1,王淼1,杜煥青1,董鳳偉1,3,葛嘯虎1,2,* (1)天津外泌體科技有限公司
發(fā)布日期:2022-09
摘要:采用密度離心法純化牛乳外泌體,研究其對(duì)皮膚屏障的影響。TEM、nanoFCM、Western-blot、LC-MS和BCA檢測(cè)表明,所獲得的牛乳外泌體為高純度的外泌體產(chǎn)物,其外觀、粒度和標(biāo)記物符合牛乳外泌體的典型特征液。然后使用蛋白質(zhì)組學(xué)。結(jié)果表明,牛奶外泌體有助于細(xì)胞間的粘附,表明其具有皮膚屏障修復(fù)的作用。然后將HaCat細(xì)胞與牛乳外泌體孵育,細(xì)胞蛋白質(zhì)組學(xué)分析證實(shí),在所有劑量下,牛乳外泌體都上調(diào)了緊密連接蛋白Claudin-1和Claudin-6,下調(diào)了PPP2R1A和PPP2R2A等負(fù)調(diào)控因子。與蛋白質(zhì)組學(xué)結(jié)果相一致的分子分析表明,Claudin-1在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平上均上調(diào)。然后用熒光染料標(biāo)記牛乳外泌體并局部涂于小鼠皮膚上。用熒光共聚焦顯微鏡觀察了標(biāo)記的牛乳外泌體的表皮痕跡。免疫組化檢測(cè)進(jìn)一步證實(shí),Claudin-1外用小鼠皮膚48小時(shí)后增強(qiáng)。
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