建立了一種新的乳源外泌體的二維高效液相色譜純度分析方法
發布時間:
2024-07-12
來源:
https://doi.org/10.1101/2023.02.22.529450
作者:陸路1,#,韓春樂1,#,張權1,#,王淼1,祁冬麗1,高夢雅1,王娜3,尹建新1,董鳳偉1,葛嘯虎1,2,*
發布日期:2023-02-23
摘要:外泌體作為細胞間通訊載體參與了許多生物過程。由于外泌體作為細胞和基因治療以及藥物遞送應用的天然載體被越來越多地探索,因此擁有高質量的樣品至關重要。蛋白:顆粒比法、ELISA法、western blotting法、聚合酶鏈反應法和排粒徑高效液相色譜法是近年來廣泛應用于外泌體純度分析的主要方法。然而,目前還沒有一種行之有效的方法可以方便地對外泌體樣品中的小尺寸雜質進行常規質量分析。本文采用尺寸排除高效液相色譜法(SE-HPLC)、離子交換高效液相色譜法(IEX-HPLC)和新型二維高效液相色譜法(2D-HPLC)對牛乳源性外泌體的純度進行了檢測,并對不同的外泌體分離工藝進行了詳細的研究。結果表明,2D-HPLC法能夠提高檢測外泌體純度的準確性,具有較高的儀器精度和準確性,減少了人員誤差和實驗成本,大大縮短了分析時間,自動化程度更高。2D-HPLC方法快速、選擇性高、靈敏度好,適用于外泌體的藥物和毒理學分析。